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無菌接種操作 — 微生物斜面接種操作要點(diǎn)

發(fā)布時(shí)間:2024-10-23    瀏覽次數(shù):2110

接種是微生物檢驗(yàn)技術(shù)的最基本操作,微生物的傳代和擴(kuò)大培養(yǎng)都需要接種或移種。接種是指將微生物接到適合其生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物上使微生物繁殖的操作。

移種是指將已培養(yǎng)好的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到新鮮的培養(yǎng)基中,使其進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng)和生長(zhǎng)繁殖的操作。接種工具常用的有接種針、接種環(huán)、移液管等。

接種過程是一個(gè)無菌過程,接種工具、接種環(huán)境以及培養(yǎng)基都應(yīng)該保證無菌。

今天我們介紹一下斜面直接接種的操作,具體操作如下:

一、斜面劃線

具體操作見下圖:


1)將菌種管和待接種斜面試管握在左手中,試管底接觸掌心。斜面一面向上,并處于接近水平位置。

2)先菌種和待接種斜面試管的棉塞旋轉(zhuǎn)一下,以便接種時(shí)易于拔出。右手以拿筆或拿毛筆的姿勢(shì)捏住接種環(huán)金屬柄,將要伸入試管部分的金屬柄和金屬絲在酒精燈火焰外焰上灼燒滅菌。

3)用右手小指、無名指和手掌下沿將兩管的棉塞同時(shí)夾住并拔出,棉塞不得接觸任何物品,更不得放在桌面上。

4)再將兩個(gè)試管口在火焰上灼燒。將灼燒過的接種環(huán)伸入接種管內(nèi)。使接種環(huán)在試管內(nèi)壁上冷卻,然后用接種環(huán)在菌苔上刮取少許后抽出,抽出時(shí)勿與試管壁相碰,也不要通過火焰。

5)迅速將粘有菌種的接種環(huán)伸入待接種斜面試管內(nèi),自斜面底部向上往復(fù)“之”字劃線,注意不要?jiǎng)澠骗傊?/span>

6)劃線完畢后將接種環(huán)抽出,灼燒管口,塞上棉塞。塞棉塞時(shí)勿用試管口去迎棉塞,以免試管離開火焰周圍無菌環(huán)境時(shí)污染雜菌。檢查試管塞是否塞緊后將其放于試管架上?;鹧孀茻?a href="http://www.qsenn.com.cn/jiezhonghz.html" target="_blank">接種環(huán)。

二、斜面穿刺

這里提到的斜面穿刺是指固體高斜面穿刺,如下圖。


這是把目標(biāo)菌苔通過接種針接種到固體培養(yǎng)基內(nèi)部和斜面上的一種接種方法。沙門氏穿刺接種三糖鐵斜面的操作就屬這種情況。穿刺固體培養(yǎng)基是為了觀察細(xì)菌在深層培養(yǎng)基中生長(zhǎng)和代謝的情況。

操作時(shí)用筆直的接種針,從長(zhǎng)有目標(biāo)菌的培養(yǎng)基上挑取少量菌苔。將接種針平穩(wěn)刺入培養(yǎng)基,勿觸到管底(距離試管底部大約2mm~3mm),也不可碰到試管內(nèi)壁,然后沿原穿刺途徑慢慢抽出接種針,最后在斜面上進(jìn)行“之”字劃線。

這里需要特別注意的是:斜面劃線和穿刺操作一定針對(duì)純培養(yǎng)物,否則實(shí)驗(yàn)操作是無意義的。劃線或穿刺的目的是為了將純培養(yǎng)物二次傳代培養(yǎng)。這種操作也見于標(biāo)準(zhǔn)菌株復(fù)壯或傳代。整個(gè)操作過程中要嚴(yán)格規(guī)范操作,嚴(yán)格控制交叉污染。

文章來源:“食品微生物檢測(cè)”公眾號(hào);
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