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English

Easy Digestion T-vector(pED-T)(規(guī)格:20次×5 | 貨號:HKT002-01B)

英文名稱:Easy Digestion T-vector(pED-T)

貨 號 :HKT002-01B

規(guī) 格 :20次×5

用途:專 用T載體

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說明書
微生物圖冊
行業(yè)應(yīng)用
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產(chǎn)品名稱:Easy Digestion T-vector(pED-T)

產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:

編號產(chǎn)品名稱規(guī)格產(chǎn)品介紹價格
HKT002-01BEasy Digestion T-vector(pED-T)20次×5T載體2398

產(chǎn)品描述:
      Easy Digestion T-vector是一種PCR產(chǎn)物高效TA克隆的專 用T載體,它由pTZ19R 載體改造而成。Easy Digestion T- vector在插入位點(diǎn)兩端特別設(shè)計了兩個BamH I位點(diǎn),使插入片 段可以用BamH I單酶切檢測及亞克隆,另外還可以使用非常廉 價和高效的EcoR I與Hind III雙酶切檢測及亞克隆。
      Easy Digestion T-vector 保留了pTZ19R 載體的所有功能: PCR 產(chǎn)物插入后可以利用 α-互補(bǔ)性進(jìn)行藍(lán)白斑篩選,挑選陽性 克隆;可以用M13F、M13R 通用引物對PCR 產(chǎn)物進(jìn)行測序;含 有T7 RNA 聚合酶的啟動子,可以對插入片段進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄。

Easy Digestion T-vector(pED-T) 產(chǎn)品包裝(A包裝):

Easy Digestion T-vector(pED-T) 產(chǎn)品包裝(A包裝)

操作方法:

      1) 選擇合適的連接體系(詳細(xì)介紹見背面)。 
      2) 取10μL 加入至 100μL 感受態(tài)細(xì)胞中,用移液 槍吹打混合,冰上放置30 分鐘。 
      3) 將離心管置于 42℃水浴中,熱擊 60-90 秒,迅 速將離心管置于冰上,放置 2-3 分鐘。 
      4) 向每個離心管中加入 500μL 無菌不含抗生素的 LB 或SOC 培養(yǎng)基中,37℃搖床,150rpm 振蕩培養(yǎng) 45 分鐘,使質(zhì)粒上氨芐抗性基因表達(dá),菌體復(fù)蘇。 
      5) 吸取200μL 已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含氨芐 青霉素的 LB 或SOC 固體平板上,用無菌涂布棒將細(xì) 胞均勻涂開,將平板置于 37℃培養(yǎng)箱里直至液體完全 吸收,倒置培養(yǎng) 12-16 小時。 
      6) PCR檢測,利用試劑盒自帶的高速PCR擴(kuò)增試 劑2×FastTaq Mast Mix直接進(jìn)行菌落PCR鑒定。

pED-T 結(jié)構(gòu)圖

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