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English

HKE365-01A NLS-Cas9 Nuclease(核酸酶)

英文名稱:NLS-Cas9 Nuclease

貨 號 :HKE365-01A

規(guī) 格 :50μg/盒

用途:crispr基因編輯(核酸酶)

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產(chǎn)品名稱:NLS-Cas9 Nuclease
中文名稱:NLS-Cas9 核酸酶

產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:

編號產(chǎn)品名稱規(guī)格產(chǎn)品介紹價格
HKE365-01ANLS-Cas9 Nuclease50μg/盒crispr基因編輯(核酸酶)1365

產(chǎn)品描述:CRISPR/Cas9是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適 應性免疫防御系統(tǒng)。CRISPR/Cas9系統(tǒng)通過將入侵噬菌體和質(zhì)粒 DNA的片段整合到CRISPR序列中,并利用相應的CRISPR RNAs (crRNAs)來指導Cas9蛋白對同源序列的降解,從而提供免疫性。 人工改造過的Cas9/sgRNA系統(tǒng)通過sgRNA(short guide RNA)引導 Cas9蛋白識別并剪切帶有sgRNA靶點的雙鏈DNA,可用于基因敲除 和精確編輯DNA等操作。本試劑盒提供的Cas9核酸內(nèi)切酶通過在蛋 白兩端加了核定位信號(NLS),可使蛋白進入細胞核內(nèi)進行基因 組編輯。

產(chǎn)品特點:純蛋白體系,避免CRISPR基因敲除時引入質(zhì)粒或病毒干擾。

產(chǎn)品用途:
      1,基于蛋白與sgRNA轉(zhuǎn)染的非病毒載體CRISPR基因敲除;
      2,基于蛋白與sgRNA轉(zhuǎn)染的非病毒載體CRISPR基因敲入;
      3,sgRNA 剪切靶點DNA 效率檢測,降低體內(nèi)篩選成本;
      4,體外剪切靶 DNA 的特異位點。

應用實例:圖例)Cas9 Nuclease做 DNA片段切割活性檢測。

NLS-Cas9 Nuclease應用實例

      帶有靶位點的DNA片段為6100 bp;
      酶切后的片段為3900 bp和 2200 bp。

保存溫度:-20℃保存,或-80℃長期保存。

NLS-Cas9 Nuclease 產(chǎn)品包裝(A包裝):

產(chǎn)品組成體積
NLS-Cas9 Nuclease(1μg/ μL)50 μL
10×Reaction Buffer500 μL
*HKE365-02 系列為 5 μg/μL濃度,共 10μL。

體外切割體系(20μL):

dsDNA200 ng
sgRNA200 ng
NLS-Cas9 Nuclease0.5-1 μg
10×Reaction Buffer2 μL
RNase Free Water至 20 μL

37 ℃保溫 1 h、70℃保溫 10 min
注:可在反應體系中添加 20U 的 RNase Inhibitor,防止 dsDNA 不純導致 sgRNA 的降解。

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HKE367**Cas9(H840A)Nickase
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* 為 Cas9(D10A)Nickase,能在與 sgRNA 靶序列互補的 DNA 鏈上產(chǎn)生切口,從而形成功能性的單鏈斷裂,可以減 少意外的脫靶基因修飾。
** 為 Cas9(H840A)Nickase,能在與 sgRNA 靶序列非互 補的DNA 鏈上產(chǎn)生切口,從而形成功能性的單鏈斷裂,可以 減少意外的脫靶基因修飾。
*** 為 Cas9(D10A,H840A) Nuclease,具有靶DNA 結(jié)合活性, 但無切割活性,可用于陰性對照等用途。

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