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一種檢測(cè)面粉中VBNC鼠傷寒沙門氏菌的方法

發(fā)布時(shí)間:2024-11-18    瀏覽次數(shù):419

面粉中的沙門氏菌引起的感染

根據(jù)美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)和疾病控制與預(yù)防中心 (CDC) 的報(bào)告,在2023年,一種與面粉消費(fèi)相關(guān)的沙門氏菌爆發(fā)導(dǎo)致了全美13個(gè)州的14例感染病例。此外,從2017年至2022年,生面團(tuán)因受到沙門氏菌或大腸桿菌O157:H7污染而導(dǎo)致召回或爆發(fā)事件達(dá)22起。這些事件顛覆了面粉干燥性質(zhì)使其成為低風(fēng)險(xiǎn)成分的普遍誤解。事實(shí)證明,細(xì)菌病原體如沙門氏菌和大腸桿菌O157:H7可以在小麥粉中長(zhǎng)期存活。

檢測(cè)面粉中沙門氏菌的重要性

在面粉中檢測(cè)病原體非常復(fù)雜,特別是當(dāng)它們進(jìn)入活但非培養(yǎng)可得(VBNC)狀態(tài)時(shí)。在這種狀態(tài)下,細(xì)菌仍保持代謝活性但無(wú)法通過(guò)常規(guī)平板法檢測(cè)到,這給公共衛(wèi)生和食品安全帶來(lái)了重大風(fēng)險(xiǎn)。已知這些細(xì)菌能夠在VBNC狀態(tài)下維持其致病性,因而微生物監(jiān)測(cè)和確保食品安全的準(zhǔn)確快速檢測(cè)方法得到了人們的關(guān)注。

ddPCR和DNA嵌入染料檢測(cè)沙門氏菌

該研究[1]使用ddPCR結(jié)合DNA嵌入染料的方法,成功地檢測(cè)了沙門氏菌的invA基因,并量化了其在不同環(huán)境條件下的存活狀態(tài)。該方法不僅能夠評(píng)估細(xì)胞的活力,還能夠與傳統(tǒng)的qPCR和計(jì)數(shù)方法進(jìn)行比較,為食品加工和儲(chǔ)存中的微生物污染提供了新的見(jiàn)解。此外,該研究還發(fā)現(xiàn)了DNA嵌入染料的有效性和靈敏度,以及它們?cè)趨^(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞方面的潛力。

圖1 ddPCR對(duì)10倍稀釋的pDNA中S.Typhimurium的invA基因進(jìn)行定量

圖1 ddPCR對(duì)10倍稀釋的pDNA中S.Typhimurium的invA基因進(jìn)行定量

比較平板計(jì)數(shù)法和DNA-染料活細(xì)胞檢測(cè)法(包括PMA、DyeTox13、DyeTox13+EMA,以及無(wú)處理)的結(jié)果。在不同劑量的沙門氏菌濃度下,在不同的儲(chǔ)存溫度下對(duì)沙門氏菌進(jìn)行培養(yǎng),并測(cè)試其生理狀態(tài)。(A)、(B)和(C)分別指在4℃、25℃和37℃下培養(yǎng)的面粉樣品,并通過(guò)ddPCR進(jìn)行檢測(cè)。

圖2比較平板計(jì)數(shù)法和DNA-染料活細(xì)胞檢測(cè)法(包括PMA、DyeTox13、DyeTox13+EMA,以及無(wú)處理)的結(jié)果。在不同劑量的沙門氏菌濃度下,在不同的儲(chǔ)存溫度下對(duì)沙門氏菌進(jìn)行培養(yǎng),并測(cè)試其生理狀態(tài)。(A)、(B)和(C)分別指在4℃、25℃和37℃下培養(yǎng)的面粉樣品,并通過(guò)ddPCR進(jìn)行檢測(cè)。

總結(jié):該研究為食品加工和儲(chǔ)存中的微生物污染提供了新的見(jiàn)解,但仍需要進(jìn)一步的研究來(lái)確定其他細(xì)菌株在不同環(huán)境條件下的存活狀態(tài)。此外,該研究還需要更多的實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證其方法的可靠性和準(zhǔn)確性。然而,該研究的結(jié)果表明,ddPCR結(jié)合DNA嵌合染料的方法具有巨大的潛力,可以成為一種快速、敏感、成本效益高且易于使用的檢測(cè)食品中病原體及其VBNC狀態(tài)的方法。這將有助于降低食品安全風(fēng)險(xiǎn)并改善公共衛(wèi)生。

參考文獻(xiàn):[1]LI L, BAE S. Quantitative detection and survival analysis of VBNC Salmonella Typhimurium in flour using droplet digital PCR and DNA-intercalating dyes [J]. Microbiology Spectrum, 2024.

來(lái)源:微生物安全與健康網(wǎng),作者~黃玲。

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