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微生物實(shí)驗(yàn)之“芽管試驗(yàn)"

發(fā)布時(shí)間:2025-02-24    瀏覽次數(shù):1449

芽管試驗(yàn)(Germ tube test)是一種用于快速鑒定白色念珠菌(Candida albicans)的常用方法。 該試驗(yàn)通過(guò)觀察酵母細(xì)胞在特定條件下是否能夠形成芽管來(lái)區(qū)分白色念珠菌和其他酵母菌。 

原理與方法

芽管試驗(yàn)的基本原理是白色念珠菌在含有營(yíng)養(yǎng)成分的液體培養(yǎng)基中,特別是在37°C下培養(yǎng)2-4小時(shí)后,能夠形成芽管。 芽管是一種短小、無(wú)隔膜的發(fā)芽酵母絲,其寬度約為原細(xì)胞寬度的一半,長(zhǎng)度是原細(xì)胞長(zhǎng)度的三到四倍。 

 芽管是一種短小、無(wú)隔膜的發(fā)芽酵母絲,其寬度約為原細(xì)胞寬度的一半,長(zhǎng)度是原細(xì)胞長(zhǎng)度的三到四倍

操作步驟

1、材料準(zhǔn)備:取0.5-1.0 mL人或動(dòng)物血清,加入到接種環(huán)中。 

2、培養(yǎng)條件:將接種環(huán)輕輕觸碰待測(cè)菌落,然后將血清滴入培養(yǎng)皿中,置于35-37°C的恒溫箱中培養(yǎng)3小時(shí)。 

3、顯微鏡觀察:培養(yǎng)后,取一滴培養(yǎng)液涂片,覆蓋一層薄薄的玻璃片,在低倍鏡下觀察芽管的存在或缺失。 若在高倍鏡下確認(rèn)芽管,則可判定為白色念珠菌。 

 芽管試驗(yàn) - 白色念珠菌

敏感性和特異性

芽管試驗(yàn)的敏感性和特異性通常較高。 研究表明,使用人血清進(jìn)行芽管試驗(yàn)時(shí),敏感性可達(dá)98%-100%,特異性也接近100%。 然而,需要注意的是,熱帶念珠菌(Candida tropicalis)有時(shí)也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。 血瓊脂培養(yǎng)基(BHI)也是一種有效的誘導(dǎo)劑,其敏感性和特異性分別為96%和97%。胰蛋白胨水的敏感性和特異性較低,分別為85%和67%。穆勒-亨利培養(yǎng)基(MH)的敏感性和特異性較高,分別為93%和92%。

影響因素

1、溫度:最佳溫度為37°C。 

2、培養(yǎng)基:不同的培養(yǎng)基對(duì)芽管形成的影響不同。 例如,人血清和BHI(Brain Heart Infusion)培養(yǎng)基是較好的誘導(dǎo)劑。 

3、培養(yǎng)時(shí)間:培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能導(dǎo)致非白念珠菌菌株誤判為陽(yáng)性。 

培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能導(dǎo)致非白念珠菌菌株誤判為陽(yáng)性

4、接種量:接種量不足可能影響芽管的形成。 

局限性

芽管試驗(yàn)廣泛應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室中,用于快速鑒定白色念珠菌。 然而,該方法也存在一些局限性:
1、熱帶念珠菌有時(shí)也會(huì)產(chǎn)生芽管導(dǎo)致假陽(yáng)性產(chǎn)生;
2、某些白念珠菌菌株可能不形成芽管;
3、新鮮血清或冷凍血清均可用于芽管試驗(yàn),但冷凍血清可能會(huì)影響結(jié)果;
4、使用人血清時(shí)需注意可能攜帶的病毒(如HIV、乙型肝炎病毒等),因此建議使用非人血清基質(zhì)作為替代;
5、環(huán)境條件(如溫度、濕度)可能影響芽管的形成。

芽管試驗(yàn)是一種簡(jiǎn)單、快速且可靠的初步鑒定白色念珠菌的方法。 盡管存在一定的局限性,但通過(guò)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件和選擇合適的誘導(dǎo)劑,可以顯著提高試驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。

文章來(lái)源:環(huán)凱轉(zhuǎn)載于“ 檢驗(yàn)世界”公眾號(hào);原標(biāo)題:“微生物實(shí)驗(yàn)之“芽管試驗(yàn)"”;作者~腳丫。
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