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TQ001D1 細(xì)菌基因組 DNA 純化試劑盒(磁珠法)

英文名稱:Bacterial DNA purification kit (Magnetic bead)

貨 號 :TQ001D1

規(guī) 格 :16T/板×2 板

用途:用于各種細(xì)菌樣本中純化高純度的 DNA

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說明書
微生物圖冊
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產(chǎn)品名稱:細(xì)菌基因組 DNA 純化試劑盒(磁珠法)
英文名稱:Bacterial DNA purification kit (Magnetic bead)

產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:

編號產(chǎn)品名稱規(guī)格
TQ001D1
細(xì)菌基因組 DNA 純化試劑盒(磁珠法)16T/板×2 板

產(chǎn)品簡介:用于各種細(xì)菌樣本中純化高純度的 DNA,其原理是利用裂解液裂解釋放基因組 DNA;隨后利用蛋白酶 K 降解膜蛋白和纏繞DNA 的核蛋白,使 DNA 充分游離;游離的 DNA 特異性地吸附到磁珠上,通過電磁進(jìn)行捕獲和轉(zhuǎn)移并在深孔板中振蕩進(jìn)行雜質(zhì)清除;最后洗脫液將 DNA 從磁珠上洗脫達(dá)到純化目的。

儲存條件及有效期:2~8℃保存,有效期 12 個月,請在有效期內(nèi)使用。

適用儀器:全自動核酸提取儀或工作站,部分產(chǎn)品可能因加熱槽的位置可能存在不兼容,使用前請仔細(xì)閱讀說明書或咨詢售前。

試劑盒組成:

序號產(chǎn)品組成規(guī)格
196 孔預(yù)封裝深孔板16T/板,2 板
2溶菌 
3溶菌酶緩沖液 
4蛋白酶 K 
5蛋白酶 K 緩沖液 
6懸浮液 
7使用說明書1 份

樣本要求:新鮮細(xì)菌培養(yǎng)液或菌落懸浮液。

細(xì)菌基因組 DNA 純化試劑盒(磁珠法) 使用方法:

● 初次使用前請在去蛋白緩沖液和漂洗液中加入無水乙醇,參見瓶身標(biāo)簽或使用說明書。

1,吸取 1~2 mL 對數(shù)生長期細(xì)菌培養(yǎng)液于 1.5 mL 離心管中。12,000 r/min 離心 1 min,盡量吸除上清。
2,對革蘭氏陰性菌,向離心得到的菌體沉淀中加入 200 μL懸浮液,渦旋振蕩至充分懸浮。
3,對革蘭氏陽性菌,需加入溶菌酶輔助破壁處理。具體方法為:向步驟 1 中收集的菌體沉淀加入 120 μL 懸浮液,充分懸浮后加入 80 μL 的溶菌酶,37℃水浴 30 min。

● 未知菌落按照革蘭氏陽性菌處理。

4,如需要去除 RNA,可加入 4 μL RNase A (100 mg/mL)溶液,震蕩混勻后,室溫放置 5 min。5,加入 20 μL 蛋白酶 K,55℃水浴 30 min。
5,加入 20 μL 蛋白酶 K,55℃水浴 30 min。
6,從試劑盒中取出預(yù)裝板后,顛倒數(shù)次使磁珠重懸混勻。手動拍甩預(yù)裝板或使用板式離心機進(jìn)行離心(500 rpm離心 1min),使試劑和磁珠集中到孔板底部。使用前小心撕去鋁箔封口膜,防止液體濺出。
7,在 96 深孔板的第 1 列和第 7 列每孔中分別加入 200 μL樣本(樣本不足 200 μL 時加入無酶水補至 200 μL)和30 μL 蛋白酶 K,加樣時盡量將移液槍頭插入孔底,避免樣液殘留在板壁上。
8,將準(zhǔn)備好的 96 深孔板放置在 32 通道核酸自動提取儀的深孔板底座上,并將 8 孔磁棒套插入磁棒套卡槽內(nèi)。
9,打開儀器操作軟件,選擇或設(shè)置核酸自動化提取程序(具體參數(shù)如下表),如需要手動設(shè)置,按照下列程序進(jìn)行設(shè)置:

選擇或設(shè)置核酸自動化提取程序

10,自動化程序結(jié)束后,取出 96 深孔板,第 5 列及第 11 列的液體即為提取的核酸溶液,轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中,置于-20 ℃保存(長期保存應(yīng)置于-80 ℃)。

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