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培養(yǎng)基傾倒方法及步驟

發(fā)布時(shí)間:2024-11-01    瀏覽次數(shù):1240

1、溫度調(diào)節(jié)。培養(yǎng)基傾注的適宜溫度大約為45℃。如果溫度過(guò)高,會(huì)導(dǎo)致凝固時(shí)間延長(zhǎng),且皿蓋上會(huì)有大量冷凝水,不利于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果溫度過(guò)低,則可能導(dǎo)致倒板過(guò)程中瓶中培養(yǎng)基部分凝固。

2、添加成分。如果培養(yǎng)基需要加入添加成分,這些成分在加入前應(yīng)先放置到室溫,以避免冷的液體造成瓊脂凝結(jié)或形成片狀物。

3、靜置時(shí)間。培養(yǎng)基滅菌后應(yīng)放置在水浴或烘箱中,使用前拿出直接倒板。培養(yǎng)基的靜置時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),一般不超過(guò)4小時(shí),以避免瓊脂少量凝固。

4、平板準(zhǔn)備。倒皿前,平皿應(yīng)保持在35℃~40℃的溫度。如果需要表面接種,有冷凝水的平板表面容易產(chǎn)生蔓延菌落。這時(shí)可放在有對(duì)流的無(wú)菌凈化臺(tái)中吹干培養(yǎng)基表面,但不能過(guò)度干燥,否則培養(yǎng)過(guò)程中平板容易開(kāi)裂。

5、傾注量。平板傾注量一般在18~20mL左右,如果培養(yǎng)時(shí)間超過(guò)48小時(shí)或培養(yǎng)溫度高于40℃,為防止水分過(guò)量蒸發(fā)導(dǎo)致平板開(kāi)裂,傾注量一般為25mL左右。

6、避免氣泡。倒平板時(shí)盡量貼著平皿壁緩慢倒入,將氣泡留在瓶子底部。如果平板中有少量氣泡的話(huà),可以把氣泡輕搖到平板壁上,這樣不會(huì)影響結(jié)果觀察。

7、混合均勻。每個(gè)平板中加入10mL融化的瓊脂培養(yǎng)基并迅速往復(fù)搖動(dòng)和轉(zhuǎn)圈晃動(dòng)5~15次使培養(yǎng)基與接種物充分混合。

8、培養(yǎng)。待平板冷卻后翻轉(zhuǎn)并置于適當(dāng)?shù)臏囟认屡囵B(yǎng)。

在整個(gè)操作過(guò)程中,需要注意避免污染,使用前需將裝有培養(yǎng)基的瓶子或試管弄松,然后放在滾水或蒸汽浴里進(jìn)行溶解,要小心避免培養(yǎng)基過(guò)熱變質(zhì)。已消毒培養(yǎng)皿的數(shù)量要比所測(cè)樣品的數(shù)量多一個(gè)做空白對(duì)照。

文章來(lái)源:環(huán)凱轉(zhuǎn)載于“食品微生物檢測(cè)”公眾號(hào);
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培養(yǎng)皿

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