国模大尺度私拍,三级黄视频,久久综合中文字幕,亚洲无码不卡高清无毛视频

English

乳與乳制品中需氧芽孢及嗜熱需氧芽孢數(shù)的測定

發(fā)布時間:2023-07-21      瀏覽次數(shù):6379    分享:

快速閱讀:
      需氧芽孢總數(shù)測定1
      嗜熱需氧芽孢總數(shù)測定2

農(nóng)業(yè)標準NY/T1331-2007標準中的定義:

NY/T1331-2007

需氧芽孢總數(shù) total aerobic bacterial spores 指在有氧條件下,經(jīng)80℃加熱處理10min,能存活并且于36℃下培養(yǎng)48h在MPC瓊脂平板上形成可計數(shù)的菌落總數(shù)。

嗜熱需氧芽孢 thermophilic aerobic bacterial spores 指在有氧條件下,經(jīng)100℃加熱處理30min,能存活并且于55℃下培養(yǎng)48h在DTA平板上形成可計數(shù)菌落的微生物。

芽孢菌污染是現(xiàn)代乳制品生產(chǎn)加工過程中的污染之一。

原料乳、消毒奶、煉乳、奶粉中,均不同程度的耐熱需氧和厭氧芽孢桿菌污染,如果這些耐熱菌在奶制品中達到一定濃度,必然引起奶制品變質,它們會導致乳與乳制品品質下降、風味改變、保質期縮短及加工過程異常等,甚至危害人體健康。

01 污染源 :① 乳的良好營養(yǎng)適宜微生物生長。據(jù)報道,芽孢桿菌屬在原料乳中污染最嚴重。芽孢是某些細菌在生長發(fā)育后期,在細胞內(nèi)形成一個圓形或橢圓形的抗逆性休眠體。② 農(nóng)場中的飼料、±壤和糞便等易受芽孢菌污染,牛舍周圍也廣泛存在芽孢菌,這些菌易污染奶牛乳頭表面,使原料乳污染芽孢菌。

02 影響 :這些耐熱菌在奶制品中達到一定濃度,必然引起奶制品變質,它們會導致乳與乳制品品質下降、風味改變、保質期縮短及加工過程異常等,甚至危害人體健康。

03 檢測原理:將樣品加熱處理以除去非芽孢菌,然后向樣液中加入能為芽孢菌提供豐富營養(yǎng)的乳平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基,放入合適環(huán)境下培養(yǎng),最后計數(shù)。

需氧芽孢總數(shù)測定

一、標準依據(jù)農(nóng)業(yè)標準NY/T1331-2007《乳與乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜熱需氧芽孢數(shù)的測定》中第二部分:需氧芽孢總數(shù)測定。

二、原理取一定量的液體檢樣或檢樣的初級稀釋液,將其在80℃下加熱10min,在MPC瓊脂培養(yǎng)基內(nèi),于36℃條件下培養(yǎng)48 h,菌落計數(shù),算出每毫升(克)檢樣中的需氧芽孢總數(shù)。

三、檢測程序

需氧芽孢總數(shù)檢驗程序

四、接種及培養(yǎng)

1 檢樣處理

1.1 以無菌操作打開待檢樣品包裝容器,液體樣品應避免形成泡沫。

1.2 以無菌操作稱取固體或半固體檢樣10g(或25g)于含有90mL(或225 mL)預熱至45℃的滅菌稀釋液(蛋白胨-鹽溶液或磷酸鹽緩沖液)的三角燒瓶中(瓶內(nèi)預置適當數(shù)量的玻璃珠),經(jīng)充分振搖(必要時用均質器均質或無菌乳缽研磨)制成10-1初級稀釋液。

2 加熱處理

2.1 用無菌吸管吸取液體檢樣、固體或半固體檢樣的初級稀釋液5mL~10mL于無菌試管中,注意不應使樣液接觸到超出水面和位于水面下2cm以內(nèi)的試管內(nèi)壁。

2.2 立即將上述試管放人80℃±1℃的水浴中,使試管內(nèi)液面至少低于水面4cm。

2.3 加熱處理10min±1min。在對照管中放一支溫度計測定溫度。試管內(nèi)樣液的升溫時間不應超過5min。

2.4 將加熱處理后的試管取出立即放到20℃以下的流水中冷卻。

3 進一步稀釋液的制備

用一支1mL無菌吸管,吸取1mL經(jīng)加熱處理的樣液,于含有9mL無菌稀釋液的試管中,振搖試管,混合均勻,,獲得其10倍稀釋液(液體檢樣10-1稀釋液或固體檢樣10-2稀釋液)。按上述操作方法,做10倍遞增稀釋,如此每遞增稀釋一次,換用一支1mL無菌吸管。

4 接種和培養(yǎng)

4.1 根據(jù)對樣品中芽孢含量的估計,選擇適宜的稀釋度,即通過正確地選擇,使得在培養(yǎng)結束后至少有一個培養(yǎng)皿里長出10個~150個菌落。分別在做10倍遞增稀釋的同時,即以吸取該稀釋度的吸管移1mL該稀釋液于無菌培養(yǎng)皿內(nèi),每個稀釋度接種兩個培養(yǎng)皿。

4.2 立即傾注12mL~15mL已融化并冷卻至45℃±1℃的MPC瓊脂培養(yǎng)基到每個培養(yǎng)皿中。

4.3 小心地轉動培養(yǎng)皿使接種樣液和培養(yǎng)基混合均勻,水平放置使混合物凝固。從熱處理結束到接種樣液和培養(yǎng)基混合所用的時間不得超過15min。

4.4 接種樣液的同時,用1mL稀釋液,作空白試驗。

4.5 待瓊脂凝固后,堆疊培養(yǎng)皿,倒置在培養(yǎng)箱中,于36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h。

注:為了避免菌落蔓延使得無法計數(shù),可采取以下措施:
      ① 待培養(yǎng)皿里的混合物凝固后,于其上再鋪一層(約5mL)還保持液體狀態(tài)的該培養(yǎng)基;
      ② 待培養(yǎng)皿里的混合物凝固后,翻轉培養(yǎng)皿,于培養(yǎng)皿的蓋子里放一片濾紙并在濾紙上漓幾滴甘油。

五、菌落計數(shù) 

1 做平板菌落計數(shù)時,可用肉眼觀察,需要時用放大鏡檢查。

2 蔓延的菌落被認為是單一菌落。如果被蔓延菌落所覆蓋的部分不到平板面積的1/4,計數(shù)未受影響的平板部分的菌落并計算出整個平板的相對量。如果被蔓延菌落所覆蓋的部分超過了平板面積的1/4,不應計數(shù)。

六、結果計算 

1 保留含有10個~150個菌落的培養(yǎng)皿。

用公式(2)計算每毫升或每克樣品中需氧芽孢總數(shù):

需氧芽孢總數(shù)計算公式

2 如果所有稀釋度培養(yǎng)皿中菌落數(shù)均少于10個,結果報告為“樣品中需氧芽孢總數(shù)小于10×1/d CFU/mL(g)”,式中d為最低稀釋液的稀釋度。

3 如果所有稀釋度培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)均多于150個,結果報告為“樣品中需氧芽孢總數(shù)大于150×1/d CFU/mL(g)" ,式中d為最高稀釋液的稀釋度。

嗜熱需氧芽孢總數(shù)測定

一、標準依據(jù)農(nóng)業(yè)標準NY/T1331-2007《乳與乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜熱需氧芽孢數(shù)的測定》中第三部分:嗜熱需氧芽孢總數(shù)測定。

二、原理取一定量的液體檢樣或檢樣的初級稀釋液,,將其在100℃下加熱30min,在DTA培養(yǎng)基內(nèi),于55℃條件下培養(yǎng)48h,菌落計數(shù),算出每毫升(克)檢樣中的嗜熱需氧芽孢數(shù)。

三、檢測程序

嗜熱需氧芽孢總數(shù)檢驗程序

四、接種及培養(yǎng)

1 檢樣處理

1.1 以無菌操作打開待檢樣品包裝容器,液體樣品應避免形成泡沫。

1.2 以無菌操作稱取固體或半固體檢樣10g(或25g)于含有90mL(或225 mL)預熱至45℃的滅菌稀釋液(蛋白胨-鹽溶液或磷酸鹽緩沖液)的三角燒瓶中(瓶內(nèi)預置適當數(shù)量的玻璃珠) ,經(jīng)充分振搖(必要時用均質器均質或無菌乳缽研磨)制成10-1初級稀釋液。

2 加熱處理

2.1 用無菌吸管吸取液體檢樣、固體或半固體檢樣的初級稀釋液5mL~ 10mL于無菌試管中,注意不應使樣液接觸到超出水面和位于水面下2cm以內(nèi)的試管內(nèi)壁。

2.2 立即將上述試管放入100℃的水浴中,使試管內(nèi)液面至少低于水面4 cm。

2.3 加熱處理30min±1min,從試管放人100℃水浴中開始計時。

2.4 將加熱處理后的試管取出立即放到20℃以下的流水中冷卻。

3 進一步稀釋液的制備

如果有必要,取一支1mL無菌吸管,吸取1mL經(jīng)加熱處理的樣液于含有9mL無菌稀釋液的試管中,振搖試管,混合均勻,獲得其10倍稀釋液(液體檢樣10-1稀釋液或固體檢樣10-2稀釋液)。

4 接種和培養(yǎng)

4.1 根據(jù)對樣品中嗜熱需氧芽孢含量的估計,選擇適宜的稀釋度,即通過正確地選擇,使得在培養(yǎng)結束后至少有一個培養(yǎng)皿里長出10個~150個菌落。分別在做10倍遞增稀釋的同時,即以吸取該稀釋度的吸管移1mL該稀釋液于無菌培養(yǎng)皿內(nèi),每個稀釋度接種兩個培養(yǎng)皿。

注:在每毫升(克)乳或乳制品中,常常只有少量的嗜熱需氧芽孢。如果想測出它們的數(shù)量,可以采取以下措施:
      ① 在多個培養(yǎng)皿里接種足夠量的經(jīng)加熱處理的液體樣品或經(jīng)加熱處理的初級稀釋液;
      ② 使用更大的培養(yǎng)皿,以能夠在其中接種多于1mL經(jīng)加熱處理的液體樣品或經(jīng)加熱處理的初級稀釋液。
在報告結果時,必須要注明對檢測方法進行的調整。

4.2 立即傾注12mL~15mL已融化并冷卻至45℃±1℃的DTA培養(yǎng)基到每個培養(yǎng)皿中。

4.3 小心地轉動培養(yǎng)皿使接種樣液和培養(yǎng)基混合均勻,水平放置使混合物凝固。從熱處理結束到接種樣液和培養(yǎng)基混合所用的時間不得超過15min。

4.4 接種樣液的同時,用1mL稀釋液作空白試驗。

4.5 待瓊脂凝固后,堆疊培養(yǎng)皿,把其倒置在塑料袋里,然后將其放人培養(yǎng)箱中,于55℃±1℃培養(yǎng)48h±2h。

注:為了避免菌落蔓延使得無法計數(shù),可采取以下措施:
      ① 待培養(yǎng)皿里的混合物凝固后,于其上再鋪一層(約5mL)還保持液體狀態(tài)的該培養(yǎng)基;
      ② 待培養(yǎng)皿里的混合物凝固后,翻轉培養(yǎng)皿,于培養(yǎng)皿的蓋子里放一片濾紙并在濾紙上滴幾滴甘油。

五、菌落計數(shù) 

1 做平板菌落計數(shù)時,可用肉眼觀察,需要時用放大鏡檢查。

2 蔓延的菌落被認為是單一菌落。如果被蔓延菌落所覆蓋的部分不到平板面積的1/4,計數(shù)未受影響的平板部分的菌落并計算出整個平板的相對量。如果被蔓延菌落所覆蓋的部分超過了平板面積的1/4,不應計數(shù)。

六、結果計算 

1 保留含有10個~150個菌落的培養(yǎng)皿。

用公式(3)計算每毫升或每克樣品中嗜熱需氧芽孢總數(shù):

嗜熱需氧芽孢總數(shù)計算公式

2 如果所有稀釋度培養(yǎng)皿中菌落數(shù)均少于10個,結果報告為“樣品中嗜熱需氧芽孢總數(shù)小于10×1/d CFU/mL(g)”,式中d為最低稀釋液的稀釋度。

3 如果所有稀釋度培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)均多于150個,結果報告為“樣品中嗜熱需氧芽孢總數(shù)大于150×1/d CFU/mL(g)" ,式中d為最高稀釋液的稀釋度。

說明:轉載僅為分享目的,部分文章圖片因轉載眾多無法確認原始作者的,僅標明轉載來源;版權歸原作者所有,如有問題,請聯(lián)系小編刪除,謝謝!

国产中文区二幕区2012| 欧美综合视频在线| 日韩中文字幕黄色网站| 国产精品一区av| 欧美日韩精品久久久| 日日爽视频| 999在线视频| 欧美,日韩,中文| 无码日韩精品一区二区三区视频| 人妻17p| 国产日韩欧美不卡在线二区| 亚洲 日韩 欧美 人妻| 亚洲一本大道在线| 亚洲第一av| 色777色| 亚洲中文字幕在线电影| 最新日韩高清无码| 久久久国产精品福利片| 精品久久久久久久一区二区伦理| 精品毛片av中文一区集团| 狠狠综合久久av一区二区三区| 色婷婷狠狠五月综合| 日韩精品网站| 青青超碰| hq性熟妇maturetube| 欧美人妖久久久aaa片| 五月综合亚洲| 久久精品一三| 国产91色综合久久久久久| www.99 re.com| 久久久久久成人| 一区二区网站| 人人狠狠| 99精品国产免费无码| 亚洲国产欧美一区二区三区同亚洲| 一女三男黑人4P| 国产户外在线观看| 东北少妇BBw| 国产精品十八禁在线观看| 免费AV一本大道| 亚洲无码不卡高清无毛视频|